除非你像猴哥那般火眼金睛,否則,利用血球計數板來數細胞是一件痛苦的事情。浪費時間不說,關鍵是不準確,重復性也不好。若是有多個樣本,那真是讓人發瘋。這時,自動細胞計數儀應運而生,帶來了更更準確的細胞計數。
市場上有多個品牌的細胞計數儀,乍一看,好像都是經典三步曲:上樣-插入-分析。如何選擇一臺的細胞計數儀,小編來給你支兩招,讓你只選對的,不選貴的。首先,想一想平時主要對哪些細胞計數,它們的大小在什么范圍;其次,你需要什么樣的細胞信息以及通量水平;你們實驗室打算將多大一塊地方奉獻給細胞計數儀;zui后,你打算花多少錢。
市場上大部分細胞計數儀都是基于染料,以臺盼藍為主,也有碘化丙啶(PI)。正常的健康細胞能夠排斥臺盼藍,而當細胞損傷或死亡時,臺盼藍可穿透變性的細胞膜,與DNA 結合,使其著色,從而區分出活細胞和死細胞。有些細胞計數儀是基于電阻抗法,更簡便,不需要使用臺盼藍染料,但也無法分辨活細胞與死細胞。
首先為你介紹兩款熱門的細胞計數儀。之后,哈爾濱德遠科技開發有限公司還將介紹一些便攜式的細胞計數儀和高通量的儀器,囊括了市場上近期推出的大部分細胞計數儀。我們將提供詳細的參數對比和特性介紹,以便您在選購儀器時能夠方便地參考。
TC20自動細胞計數儀(Bio-Rad)
這款細胞計數儀是由Bio-Rad公司推出的。它的計數流程很簡單,就是“上樣-插入-結果”。首先將樣品上樣到計數玻片上,然后將玻片插入TC20細胞計數儀,計數自動開始,30秒內總細胞數和活細胞數就顯示在屏幕上。儀器對細胞濃度的要求為5 x 104 -1 x 107 細胞/ml。計數只需要10 µl懸浮或重懸的細胞,讓珍貴樣品得以保留。玻片上有兩個室,每次能對2個樣品進行計數。
有些細胞計數儀通過單個焦點平面來評估細胞活力,這樣得到的結論可能不太準確,而TC20細胞計數儀對多個平面的每個樣品進行打分。*的自動對焦技術和圖像分析算法在30秒內提供了準確且重復性高的細胞數量。Bio-Rad的產品認為這對于評估細胞活性尤為重要,因為焦點的差異可能顯著影響結果。
TC20系統所能接受的細胞大小是6-50 µm,適合哺乳動物細胞及一些更小的生物,如浮游生物和孢子等。若你正在使用Bio-Rad的Bio-Plex系統,那么還可以利用TC10對Bio-Plex的磁珠進行計數。
TC20能夠提供下列結果:活細胞和死細胞濃度,總細胞濃度,細胞存活率,細胞的平均大小,細胞圖像。通過USB接口,研究人員能導出帶注釋的JPEG圖像文件,用于進一步的分析,或下載計數的數據。當然,結果也能夠打印出來。
當然,光是一臺儀器還不夠,你還需要耗材和相關配件。TC20的耗材有TC20計數玻片、TC20臺盼藍、TC20系統驗證試劑盒,另外,你還可以選擇TC20熱敏打印機。據Bio-Rad介紹,TC20計數玻片也是很*的,無論用戶的移液習慣如何,它都能讓樣品均勻分布,帶來準確重復的結果。這一點很重要,試想一下,如果有的地方沒有樣品,那么就會影響計數準確性。
Countess 自動細胞計數儀(Life Technologies)
2008年,Life Technologies(當時還是Invitrogen)推出了這款細胞計數儀。它的基本參數與TC20大致相同,也是利用臺盼藍染色和圖像分析算法,在30秒內給出準確的細胞和活性計數。每次的樣本量也是2個,每次需要10 ul,只是可分辨的細胞大小略有不同,在5-60 um。細胞濃度范圍應在1×104-1×107 細胞/ml,在1×105-4×106 細胞/ml。
據Life Technologies介紹,Countess細胞計數儀的一個*之處在于其gating功能,能夠根據細胞大小分辨混合群體中的細胞。在對某一混合群體計數后,用戶隨后可保存特定的參數組,以便未來計數。此特征對于干細胞或原代細胞特別有用,讓用戶能夠排除細胞碎片和滋養層細胞。
有時,細胞會成團,使得細胞數量被低估,或細胞大小被高估,Countess細胞計數儀能夠準確分辨zui多5-6個細胞的細胞團。
至于儀器的清潔和維護,也非常簡單。Countess計數儀已經預先校準過了。如果你升級了儀器的固件,就需要校準。另外,如果你換用另一個牌子的臺盼藍或臺盼藍濃度與以前不同,那也應該重新校準。校準只需要2-3分鐘即可。除此之外,就沒有必要校準了。
點評:這兩款自動細胞計數儀在參數上不相伯仲,只有細胞大小方面的微小差異。TC20的特別之處在于多平面對焦分析,而Countess則有gating功能。現在*未知的就是價格了,用戶可根據報價再做打算。